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牛血清在培養(yǎng)的過程中出現(xiàn)“小黑點(diǎn)”的現(xiàn)象該怎么防止呢？

更新時(shí)間：2020-10-12 點(diǎn)擊次數(shù)：1518次

　　牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份，具有極為重要的功能。牛血清在培養(yǎng)基中扮演著這么多的角色，那么它在培養(yǎng)的過程中也會(huì)出現(xiàn)一些的問題，比如說：在培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)一個(gè)個(gè)“小黑點(diǎn)”的現(xiàn)象，這是怎么一回事呢？

　　我們一旦發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基中有黑點(diǎn)，我們先不要著急，也不要驚慌，要搞清楚這個(gè)黑點(diǎn)是什么？什么形成的？

　　首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動(dòng)等。如果細(xì)胞被污染，微生物則會(huì)大量繁殖，培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細(xì)胞，生長狀態(tài)良好，與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比，沒有任何變化，那么，黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：

　　首先可能是細(xì)胞生長過老，破碎的細(xì)胞殘骸；再有可能就是血清質(zhì)量不好，反復(fù)凍融的結(jié)果；然后可能是配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細(xì)胞生長；其次可能是亦有可能是配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格（可應(yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點(diǎn)）；后可能是培養(yǎng)的原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn)（可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除）。

　　那么我們?nèi)绾畏乐购邳c(diǎn)生成呢？通過我們多年的從業(yè)經(jīng)驗(yàn)，凱學(xué)生物科技認(rèn)為至少要做到以下幾點(diǎn)：

　　（1）盡可能地減少血清凍融次數(shù)；

　　（2）培養(yǎng)基無需37℃水浴；

　　（3）培養(yǎng)基保持*PH值7.0- 7.2；

　　（4）嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì)，容器定期刷洗；

　　（5）掌握細(xì)胞傳代的zui佳時(shí)機(jī)，細(xì)胞切勿生長過老。

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