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HEPES緩沖鹽溶液(2×HeBS,7.05)

簡(jiǎn)要描述：

用途：磷酸鈣法進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染,可用于即時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,pH值為7.05-7.12。

更新時(shí)間：2025-05-13

外源基因?qū)胝婧思?xì)胞的方法有很多種，如磷酸鈣轉(zhuǎn)染法、DEAE-葡聚糖轉(zhuǎn)染法、脂質(zhì)體法、電穿孔法、顯微注射法等，2×HEPES緩沖鹽溶液主要用于磷酸鈣轉(zhuǎn)染，其主要成分為HEPES，HEPES是一種非離子兩性緩沖劑，能有效控制pH值在6.8～8.2范圍，尤其在pH7.2～7.4具有較好的緩沖能力，終濃度一般為10～50mmol/L，培養(yǎng)液內(nèi)含20mmol/LHEPES即可達(dá)到較好的緩沖能力。

Leagene HEPES緩沖鹽溶液(2×HeBS)是一種常用的細(xì)胞轉(zhuǎn)染溶液，主要由HEPES、氯化鈉、磷酸鹽等組成，其pH值為7.05～7.12，經(jīng)過(guò)濾除菌處理；影響磷酸鈣轉(zhuǎn)染效率的因素主要有沉淀中DNA含量、DNA在細(xì)胞上停留的時(shí)間、休克時(shí)間；Leagene 2×HeBS要求DNA濃度在10～50μg為宜，Hela、BALB等細(xì)胞沉淀放置16h，CHO、DUKX、BⅡ等細(xì)胞可以通過(guò)甘油、DMSO進(jìn)行熱休克處理以提高轉(zhuǎn)染效率。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。